磷酸化多肽分为两种:单磷酸化多肽和多磷酸化多肽。多磷酸化多肽由于高酸度,在Fmoc固相肽合成期间会降低活化速度,因此很难合成。银河galaxy开发了两种可靠的磷酸化肽合成策略。
第一种是使用单苄基磷酸化氨基酸和Fmoc化学直接分步固相合成磷酸肽。该策略有两个棘手步骤:bzl-pAA的偶联和下一个AA的偶联。为了完成这些步骤,银河galaxy应用微波技术偶联bzl-pAA。该策略使磷酸肽合成与常规固相合成一样简单。
银河galaxy还采用全局磷酸化方法,该方法是在固相体载体上对未保护的羟基进行“保护”后磷酸化。合成后,所有需要磷酸化的残基可在液相中一步完成磷酸化。该方法的优点是避免了直接合成bzl-pAA的困难。
案例研究1
序列:Thr- .........-pTyr- .........-pTyr-pTyr- .........-Lys
案例研究2
序列:XXX…XX{PSer}XX…XX{PSer}XXXX
长度:30 AA;M.W.:3.4 kDa
纯度:>85%
案例研究3
序列:XX…{PSER}XX…XX{PSER}X…X{PTHR}XX
长度:47 AA;M.W.:5.6 kDa
纯度:>90%
案例研究4
序列:XX…{PTYR}X…X{PTYR}…{PTYR}…XX
长度:25 AA;M.W.:3.3 kDa
纯度:>85%
案例研究5
序列:XXXX{pSER}X{pSER}XX…XX{pSER}XXXXX
长度:23 AA;M.W.:2.6 kDa
纯度:>90%
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