蛋白折叠复性服务

蛋白复性服务

大肠杆菌中蛋白的高表达通常伴随着目的蛋白在包涵体中聚集。虽然尚未完全了解包涵体形成的确切机制，并且可能因不同的蛋白和表达条件而有所不同，但通常认为靶蛋白的制备速度过快，以至于大肠杆菌的细胞翻译机制无法协助蛋白以其天然3D构象折叠，从而导致错误折叠并最终形成包涵体。这些不可溶的聚集是非功能性的并阻碍研究的进程。通过体外重新折叠复性来恢复目的蛋白的生物学活性是一项艰巨的挑战。银河galaxy蛋白折叠复性服务提供一系列解决方案。

我们专有的复性技术，包括高静水压技术、小分子添加剂和柱复性方法。

服务详情

分析目的蛋白的理化性质
1L体系中进行复性优化
复性策略是根据蛋白的序列及结构性质决定的。一般来说，我们的方案包括以下几点：
1. 直接稀释法
2. 透析以及渗滤
3. 小分子物质辅助:
  - 变性剂
  - 氨基酸
  - 聚合物:胶束和脂质体
  - 酒精
  - 还原/氧化试剂
  - 盐：Na/K/Mg-Cl and (NH₄)₂SO₄
  - 糖类:葡萄糖、蔗糖和海藻糖
4. 人工伴侣：去污剂和非去污剂
5. 色谱复性技术：SEC(分子排阻层析法)、HIC(疏水相互作用层析法)、亲和层析和IEC(离子交换层析法)
6. 分子伴侣介导法：ATP-依赖型和ATP-非依赖型
7. 梯度法：PH、温度、静水压和变性剂

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蛋白服务

案例分享

1. A蛋白包涵体的变性和复性：

Fig. A-1 (left figure): Inclusion body preparation and denaturation
Lane 1: Total protein after sonication
Lane 2: The supernatant after centrifugation
Lane 3: Washed with 1 M urea
Lane 4: Dissolved by 8 M urea

Fig. A-2 (right figure): Refolded protein
Lane 1: Refolded tag-free A protein
2. B融合蛋白包涵体的变性和复性：

Fig. B-1 (left figure): Inclusion body preparation and denaturation
Lane 1: The supernatant after centrifugation
Lane 2: The precipitation after centrifugation
Lane 3: Inclusion bodies dissolved by urea
Lane 4: Flow through
Lane 5: Washed by imidazole containing urea
Lane 6: Eluted by imidazole containing urea

Fig. B-2 (right figure): Refolded protein
Lane 1 and 2: Refolded B fusion protein

客户感言

-Dr. Barry Bradford

Kansas State University, USA

"GenScript provides fast, professional protein synthesis services at very reasonable prices. By making it cost-effective to outsource protein production, GenScript has made it possible for my lab to focus on our own area of expertise and get more research done. The detailed planning, updates, and reports that GenScript provides all of the quality control that one could ask for. I strongly recommend GenScript's protein production service."

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