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服务介绍

银河galaxy2020年初引进Beacon仪器。Beacon是基于整合微流控技术、信号检测系统和光诱导的双向电泳技术的单细胞筛选仪器,应用于抗体研发中单B细胞筛选阶段。从B细胞保有率方面,传统杂交瘤筛选1%全B细胞库,而Beacon平台筛选范围涵盖全部B细胞,从筛选时间方面,筛选仅1天节省12周时间,集合以上优点,Beacon平台助您快速获得更高质量抗体。

服务特色

高概率捕获目标克隆

更快筛选时间

自动化筛选流程

更高多样性,更高亲和力

服务详情

antibody discovery via single b cell workflow

单B细胞筛选平台工作流程主要分为下列三个阶段:

阶段 描述 周期
阶段 I
动物免疫
动物免疫及起始物料准备 快速免疫:4周
传统免疫:6-8周
阶段 II
PBMC分离
B细胞扩增
PBMC分离及B细胞扩增 1周
阶段 III
Beacon仪器分选
B细胞收获及单B细胞筛选 1天
阶段 IV
单B细胞测序
多变区测序 1周
阶段 V
小规模阳性克隆表达
重组抗体表达 约四天

注:*不同项目根据实际情况有所不同

案例分享

  • Case 1: 4-1BB Antibody Development
    munber 1

    Antigen Analysis: Human 4-1BB ECD Alignment

    ECD Domain Human Cyno Mouse Rabbit
    Human Homology 100% 95% 57% 68%
    munber 2

    High positive hits screening with Beacon

    Assay (SA) beads assay

    Assay (SA) beads assay

    Valid Nano-well: 7560; Positive cell : 932
    Positive%: 12.3%

    Cell-based assay

    Cell-based assay

    Valid Nano-well: 7560; Positive cell : 112
    Positive%: 1.48%

    munber 3

    NGS sequencing

    munber 4

    Validation of recombinant antibodies with ELISA & FACS

    case step 4 icon1 31 recombinant antibodies
    case step 4 arrow
    case step 4 icon2 19 clones positive to 4-1BB via ELISA
    case step 4 arrow
    case step 4 icon3 13 clones positive to human and cyno 4-1BB via FACS
    case step 4 arrow
    case step 4 icon4 2 clones positive to human, cyno, and mouse 4-1BB via FACS

    FACS, Median Fluorescence Intensity (MFI) +/-

    FACS, Median Fluorescence Intensity (MFI) +/-
    munber 5

    Affinity analysis of 4-1BB recombinant antibodies

    KD (M) = 9.701E-08

    KD (M) = 9.701E-08

    KD (M) = 7.069E-10

    KD (M) = 7.069E-10

银河galaxy研讨会

单B细胞筛选平台助力抗体研发

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