镍填料

Ni-NTA填料

High Affinity Ni-Charged Resin FF（L00666）是一种6%高交联琼脂糖基质，共价偶联螯合剂NTA，通过四个配位键结合Ni²⁺，高亲和性纯化多组氨酸标记的重组蛋白。High Affinity Ni-Charged Resin FF具有低的Ni²⁺泄漏，高的蛋白质结合能力和稳定性，并可耐受蛋白质纯化中多种化学试剂。这使得Ni-NTA填料成为了纯化6x His标签融合蛋白的最佳选择。

• 表1. Ni-NTA亲和层析介质的特性

  骨架基质	6%交联的琼脂糖凝胶
  平均粒径	90µm（45-165 µm）
  配体	NTA
  载量	≥50mg/ml，即50mg含His标签的目的蛋白（34KD）/ml填料
  存储溶液	20%乙醇（纯填料体积占比50%）
  存储温度	2-8°C，避免冻存
  重复使用次数	可重复多次使用

• 应用案例

  1、实验条件

  • 仪器：蠕动泵，玻璃层析柱
  • 样品：Recombinant Protein A in E.coli extract（目的蛋白分子量：34KD）
  • 样品体积：21L大肠杆菌裂解液（菌泥来自70L*2发酵罐）
  • 柱体积：约4.1L（D：200mm；H：13.1cm）
  • 平衡：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min，5倍柱体积
  • 上样：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min
  • 洗杂：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10-20 mM imidazole, pH 8.0；流速700ml/min，10倍柱体积
  • 洗脱：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min
  • 溶液置换：透析或超滤至1*PBS溶液中

  2、实验结果

  

  图1. L00666纯化测试SDS-PAGE分析图

  实验结果说明：Ni-NTA纯化载量高，结合力强，纯度高

• 订购信息

  产品编号	名称	数量	价格	操作
  L00666	High Affinity Ni-Charged Resin FF		￥403.00 5 ml Resin (Total 10 ml) 25 ml Resin (Total 50 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)

Ni-TED填料

High Affinity Ni-TED Resin FF（L00885）是一款新型的固定化金属螯合层析（IMAC）填料，是将TED偶联至6%琼脂糖凝胶介质上，通过五个配位键螯合Ni²⁺离子。该填料主要用于捕获和纯化分泌到真核表达培养基上清中的组氨酸标签（His-tag）蛋白。与其它螯合剂填料相比，High Affinity Ni-TED resin具有更强的组分兼容性，可以在含有一定浓度的EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白的高效纯化。

• 表2. Ni-TED亲和层析介质的特性

  骨架基质	高交联的6%琼脂糖凝胶
  平均粒径	90μm（45～165μm）
  配体	TED
  动态载量	10mg/ml，即10mg含His标签的目的蛋白（34KD）/ml填料
  耐受压力	0.3MPa，3bar
  推荐流速	150-600cm/h
  储存溶液	20%乙醇（纯填料体积占比50%）
  储存温度	2～8℃，避免冻存
  重复使用次数	可重复多次使用

• 应用案例
  

  图2. Ni-NTA和Ni-TED耐受化学试剂的对比实验

  实验结果说明：Ni-TED对化学试剂的耐受性略高于Ni-NTA

• 订购信息

  产品编号	名称	数量	价格	操作
  L00885	High Affinity Ni-TED Resin FF		￥1253.00 10 ml Resin (Total 20 ml) 50 ml Resin (Total 100 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)