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银河galaxyNi-IDA亲和层析介质是把IDA(亚氨基二乙酸)共价偶联到4%交联的琼脂糖介质上,再通过IDA的3个结合位点螯合Ni2+制备而成,可以纯化通过包括细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等蛋白表达系统表达的、含有6xHis标签的重组蛋白。该纯化介质用来纯化天然条件下的His标签蛋白,结合在介质上的蛋白用咪唑缓冲液洗脱下来。银河galaxyNi-IDA亲和层析介质的Ni2+脱落程度很低,并具有高吸附量及高稳定性,在多聚His标签的重组蛋白的纯化实验中有非常好的表现力,具体特性见表1。

表1. Ni-IDA亲层析介质的特性

柱体积
10ml
动态吸附量
20mg 6×His标签蛋白(27kD)/ml介质
球形基质
4%交联度琼脂糖
平均粒径
90μm(45-165μm)
储存溶剂
1×PBS(含20%乙醇)
储存&稳定性
2-8℃储存18个月

应用实例

下图为银河galaxy和X公司Ni-IDA亲和层析介质的比较

图1. 分别使用银河galaxy和X公司的Ni-IDA亲和层析介质纯化含His标签的30kD可溶性重组蛋白样品,该蛋白样品来自于E.coli细胞裂解液。

  • 泳道1:上样流出液(X公司)
  • 泳道2:洗涤流出液(X公司)
  • 泳道3:洗脱流出液(X公司)
  • 泳道4:残留物(X公司)
  • 泳道5:上样流出液(银河galaxy)
  • 泳道6:洗涤流出液(银河galaxy)
  • 泳道7:洗脱流出液(银河galaxy)
  • 泳道8:残留物(银河galaxy)

产品列表

产品编号 名称 数量 价格 操作
L00223I
Ni-IDA resin
¥1240.00
 

装柱流程参考示意图

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