银河galaxyNi-IDA亲和层析介质是把IDA(亚氨基二乙酸)共价偶联到4%交联的琼脂糖介质上,再通过IDA的3个结合位点螯合Ni2+制备而成,可以纯化通过包括细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等蛋白表达系统表达的、含有6xHis标签的重组蛋白。该纯化介质用来纯化天然条件下的His标签蛋白,结合在介质上的蛋白用咪唑缓冲液洗脱下来。银河galaxyNi-IDA亲和层析介质的Ni2+脱落程度很低,并具有高吸附量及高稳定性,在多聚His标签的重组蛋白的纯化实验中有非常好的表现力,具体特性见表1。
柱体积
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10ml
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动态吸附量
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20mg 6×His标签蛋白(27kD)/ml介质
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球形基质
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4%交联度琼脂糖
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平均粒径
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90μm(45-165μm)
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储存溶剂
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1×PBS(含20%乙醇)
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储存&稳定性
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2-8℃储存18个月
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下图为银河galaxy和X公司Ni-IDA亲和层析介质的比较
图1. 分别使用银河galaxy和X公司的Ni-IDA亲和层析介质纯化含His标签的30kD可溶性重组蛋白样品,该蛋白样品来自于E.coli细胞裂解液。